Занятие 2: Методы микроскопического анализа


Лабораторная работа. Микроскопирование методом прижизненной окраски микробов


Материалы и оборудование: красители (метиленовая синь, нейтральный красный), комплект оборудования для микроскопирования, культуры микроорганизмов.


Ход работы


Метод является видоизменением метода раздавленной капли.
Для лучшей видимости микробов жидкость можно слегка подкрасить, вводя под покровное стекло небольшую каплю раствора метиленовой сини или нейтрального красного. При этом бактерии сохраняют жизнеспособность, приобретают синюю или красную окраску и будут отчетливо видны в поле зрения микроскопа.


Лабораторная работа. Метод фиксации и окраски препарата


Материалы и оборудование: карболовый фуксин, метиленовая синь, подставка для стекол, стакан с водой, культуры микроорганизмов.


Ход работы


1. Приготовление мазка. На середину чистого и обезжиренного предметного стекла нанести каплю воды, в нее ввести немного бактерий, взятых с плотной питательной среды кончиком стерильной бактериальной иглы, и тщательно перемешать. Полученную слабо мутную суспензию размазать тонким слоем на поверхности предметного стекла на площади 2–3 см². Необходимо следить, чтобы мазок не был слишком плотным.

Если изучается микрофлора жидкой питательной среды, то на предметное стекло нанести каплю этой микробной взвеси без добавления воды.

Полученный мазок высушить при комнатной температуре на воздухе. Мазок должен быть таким тонким, чтобы мог высохнуть на воздухе в течение 1–2 минут.

2. Фиксация мазка. Стекло с сухим мазком провести 3–4 раза над пламенем спиртовки. При фиксации клетки бактерии погибают и закрепляются на поверхности стекла.

3. Окрашивание мазка. На охлажденный фиксированный мазок нанести на 1–2 минуты раствор метиленовой сини или карболового фуксина. Избыток краски смыть слабой струей воды. Промывание закончить, когда промывная вода станет неокрашенной.

Промытый препарат тщательно просушить фильтровальной бумагой, прикладывая ее к мазку. Препарат рассмотреть сначала на большом увеличении с объективом ×40, а затем с объективом ×100 (с иммерсией).

Зарисовать и подписать увиденные объекты.